Amidase (AMD)
Mga enzyme:Mga macromolecular biological catalysts, kadaghanan sa mga enzyme mga protina
Amidase:I-catalyze ang hydrolysis sa nagkalain-laing endogenous ug foreign aliphatic ug aromatic amides pinaagi sa pagbalhin sa acyl group ngadto sa tubig uban sa produksyon sa free acids ug ammonia. Ang hydroxamic acids ug uban pang organic acids kay kaylap nga gigamit isip tambal tungod kay kini mga sangkap sa growth factors, antibiotics ug tumor inhibitors. Ang mga amidase mahimong bahinon sa R type ug S type acylases sumala sa catalyst stereoselectivity.
Gawas pa sa pag-catalyze sa hydrolysis sa mga amide, ang amidase mahimo usab nga mag-catalyze sa mga reaksyon sa acyl transfer sa presensya sa mga co-substrate sama sa hydroxylamine.
Ang mga amidase nga adunay lain-laing tinubdan adunay lain-laing substrate specificity, ang uban niini maka-hydrolyze lang sa aromatic amides, ang uban niini maka-hydrolyze lang sa aliphatic amides, ug ang uban maka-hydrolyze sa α-o ω-amino amides. Kadaghanan sa mga amine adunay maayong catalytic activity para lamang sa acyclic o simple aromatic amides, apan para sa complex aromatics, ang heterocyclic amides, ilabina ang mga amide nga adunay ortho substituents, kasagaran ubos ang aktibidad (pipila lang ka enzyme ang nagpakita og mas maayong catalytic effects).
Mekanismo sa katalitiko:
| Mga enzyme | Kodigo sa Produkto | Kodigo sa Produkto |
| Pulbos sa Enzyme | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | usa ka set sa 19 ka amidase, 50 mg matag usa 19 ka butang * 50mg / butang, o uban pang gidaghanon |
| Kit sa Pagsusi (SynKit) | ES-AMD-1900 | usa ka set sa 19 ka amidase, 1 mg matag usa 19 ka butang * 1mg / butang |
★ Taas nga espesipiko sa substrate.
★ Kusog nga chiral selectivity.
★ Taas nga kahusayan sa pagkakabig.
★ Mas gamay nga mga by-product.
★ Hinay nga mga kondisyon sa reaksyon.
★ Mahigalaon sa kalikupan.
➢ Kinahanglan nga himuon ang enzyme screening para sa espesipikong mga substrate tungod sa espesipikong substrate, ug pagkuha og enzyme nga mo-catalyze sa target substrate nga adunay pinakamaayong catalytic effect.
➢ Ayaw gayud pagkontak sa grabeng mga kondisyon sama sa: taas nga temperatura, taas/ubos nga pH ug organic solvent nga taas ang konsentrasyon.
➢ Kasagaran, ang sistema sa reaksyon kinahanglan maglakip sa substrate, buffer solution (Ang labing maayo nga pH sa reaksyon sa enzyme). Ang mga co-substrate sama sa hydroxylamine kinahanglan nga naa sa sistema sa reaksyon sa acyl transfer.
➢ Ang AMD kinahanglan nga idugang sa katapusan sa sistema sa reaksyon nga adunay labing maayo nga pH ug temperatura sa reaksyon.
➢ Ang tanang matang sa AMD adunay lain-laing mga optimum nga kondisyon sa reaksyon, busa ang matag usa niini kinahanglan nga tun-an pa pag-ayo.
Ehemplo 1(1):
Aktibidad sa hydrolysis ngadto sa lain-laing mga Amide Substrates
| Substrate | Piho nga kalihokan μmols min-1mg-1 | Substrate | Piho nga kalihokan μmols min-1mg-1 |
| Asetamida | 3.8 | ο-OH benzamide | 1.4 |
| Propionamide | 3.9 | p-OH benzamide | 1.2 |
| Lactamide | 12.8 | ο-NH2benzamida | 1.0 |
| Butiramid | 11.9 | p-NH2benzamida | 0.8 |
| Isobutyramide | 26.2 | ο-Toluamide | 0.3 |
| Pentanamide | 22.0 | p-Toluamide | 8.1 |
| Hexanamide | 6.4 | Nikotinamida | 1.7 |
| Sikloheksanamida | 19.5 | Isonicotinamide | 1.8 |
| Akrilamida | 10.2 | Picolinamide | 2.1 |
| Metakrilamida | 3.5 | 3-Phenylpropionamide | 7.6 |
| Prolinamide | 3.4 | Indol-3-acetamide | 1.9 |
| Benzamide | 6.8 |
Ang reaksyon gihimo sa 50mM sodium phosphate buffer solution, pH 7.5, sa 70 ℃.
| Mga Amida | Hidroksilamino | Hydrazine |
| Asetamida | 8.4 | 1.4 |
| Propionamide | 18.4 | 3.0 |
| Isobutyramide | 25.0 | 22.7 |
| Benzamide | 9.2 | 6.1 |
Ang reaksyon gihimo sa 50mM sodium phosphate buffer solution, pH 7.5, sa 70 ℃.
May kalabutan nga konsentrasyon sa reagent: amides, 100 mM (benzamide, 10 mM); hydroxylamine ug hydrazine, 400 mM; enzyme 0.9 μM.
Ehemplo 2(2):
Ehemplo 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., ug uban pa. Extremophiles, 2001, 5:183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR, ug uban pa. Proseso sa Biyokimika, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM, ug uban pa. Bioorganic Chemistry, 2017, Anaa online 7.
